為了進一步闡明《中國藥典》 2015 年版在微生物限度檢查中需氧菌總數計數上 所具備的優勢以及特點，本文采用了六種中成藥( 新癀片、海珠喘息定片、八寶丹錠劑、通脈降脂膠 囊、大七厘散和六味地黃丸) 分別按照《中國藥典》 2010 年版中細菌計數法和《中國藥典》2015 年版 需氧菌總數計數法進行方法學的驗證和建立，比 較兩版藥典在此類微生物檢測方法以及結果上的 不同，用以闡述《中國藥典》2015 年版在檢測方法 上的優點，同時指出用改進方法進行檢測時所需 要注意的問題，以更好地適應新版藥典的規定和 實施。

GNP-9270 型隔水式恒溫培養箱( 上海精宏實驗設備有限公司) ; CTHI-250B 型恒溫恒濕箱( 上海施都凱) 、MSC18 型生物安全柜( 賽默飛世爾科技有限 公司) ; HTY-602 型智能集菌儀( 杭州泰林生物技術 器械有限公司) 。

新 癀 片 ( 規 格: 0. 32 g /片，批 號: 140910、 150504、150506) ; 海珠喘息片( 規格: 0. 48 g /片，批 號: 150801 ) ; 八 寶 丹 錠 劑 ( 規 格: 3 g /粒，批 號: 140201、150101、150102) ; 通脈降脂膠囊( 規格: 0. 42 g /粒，批號: 150101) ; 大七厘散( 規格: 1. 5 g /袋，批 號: 150701、150702、150703 ) ; 六 味 地 黃 丸 ( 批 號: 150420) 均由廈門中藥廠有限公司提供。

金黃色葡萄球菌〔CMCC( B) 26 003〕、大腸埃希 菌〔CMCC( B) 44 102〕、枯草芽孢桿菌〔CMCC( B) 63 501〕、銅綠假單胞桿菌〔CMCC( B) 10 104〕、白色念 珠菌〔CMCC ( F) 98 001〕、黑 曲 霉〔CMCC ( F) 98 003) 均由中國食品藥品檢定研究院中國醫學細菌 保藏管理中心提供。

營養瓊脂、胰酪大豆胨瓊脂培養基( TSA) 、胰酪 大豆胨液體培養基( TSB) 、pH 7. 0 無菌氯化鈉-蛋白 胨緩沖液均由北京三藥科技開發有限公司提供，培 養基適用性試驗結果均符合規定。

取新癀片 10 g，( 研磨) ，加 pH 7. 0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至 100 mL，置于45 ℃水浴，混勻，制成 1∶ 10 供試液。其余五種藥物 的供試液均采用上述方法進行配制，均制成 1∶ 10 供 試液，備用。( 平皿法: 取上述供試液 1 mL( 或 0. 2 mL 或 0. 1 mL) 和上 述 菌 液 1 mL ( 含 試 驗 菌 50 ～ 100 cfu) ，分別注入平皿，立即傾注營養瓊脂培 養基，每株試驗菌平行制備 2 個平皿，按平皿法測定 其菌數。分別取海珠喘息定片、通 脈降脂膠囊、大七厘散、六 味 地 黃 丸 各 10 g，( 研 磨) ，加胰酪大豆胨液體培養基至 100 mL，置于 45 ℃ 水浴，混勻，制成 1∶ 10 供試液，備用。分別取新 癀片、海珠喘息定片、八寶丹錠劑各 10 g，研磨，加 胰酪大豆胨液體培養基至 100 mL，置于 45 ℃ 水 浴，靜置 10 min，棄粗渣，收集剩余混懸液，制成 1∶ 10 供試液，備用。再按照試驗要求，用 1 ∶ 10 供試 液稀釋成 1∶ 20 或 1∶ 50 或 1∶ 100 或 1∶ 200 的供試 液，備用。取 TSB 代替供試液，按上述試驗組 同法操作加入試驗菌液并進行相應微生物回收試驗。液以稀釋液代替菌液同試驗組操作。

由于兩版藥典回收率的表現形式不同，2010 版 為百分數形式，2015 版為比值形式，為了方便比較， 本文將“2. 2. 6”中 2015 版的回收率比值也按照回 收率的表現形式換算，同時為了簡化表格，便于數據 分析比較。

八寶丹錠劑 按《中國藥典》2015 年版藥典薄膜法要求試驗發 現沖洗 1 000 mL·膜 － 1 金黃色葡萄球菌的回收率 仍達不到 50% ，為了避免微生物受損，改按《中國 藥典》2010 年版薄膜法試驗。由表 7 可知: 1、六味 地黃丸、通脈降脂膠囊兩版藥典建立的檢測方法 均為平皿法，采用稀釋級也基本一致; 2、海珠喘息 定片、大七厘散、八寶丹錠劑、新癀片《中國藥典》 2015 年版藥典建立的檢測方法比 2010 版在稀釋 級別上均有不同程度的提高，而且海珠喘息定片、八寶丹錠劑、新癀片《中國藥典》2015 年版試驗過 程中不僅稀釋級別提高甚至需要通過靜置棄粗渣 的方法來消除藥品的抑菌性。



 

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