澤蘭源于唇形科地筍屬植物毛葉地瓜兒苗 Lycopus lucidus Turcz. var. hirtus Ｒegel 的干燥地上部分，夏 秋二季莖葉茂盛時(shí)采割，除去雜質(zhì)，曬干。具有活血調(diào) 經(jīng)，袪瘀消癰，利水消腫之功。用于月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉，痛 經(jīng)，產(chǎn)后瘀血腹痛，瘡癰腫痛，水腫腹水，澤蘭資源豐 富，價(jià)格便宜，分布于全國(guó)大部地區(qū)。對(duì)于澤蘭多糖 的超聲提取工藝在國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)公開(kāi)報(bào)道，故本研究 以澤蘭多糖的超聲提取工藝作為研究對(duì)象。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1. 1 儀器

MAPADA UV － 1800 紫 外 － 可 見(jiàn) 分 光 光 度 計(jì); METTLEＲ AE240 十萬(wàn)分之一精密天平( 瑞士) ; Sartorious BS224S 萬(wàn)分之一精密天平 ( 北京賽多利斯公 司) ; KQ － 700DB 型數(shù)控超聲波清洗器( 昆山市超聲儀 器有限公司) ; EYELA N － 100 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀( 上海愛(ài)朗 儀器有限公司) ; SHZ － D( Ⅲ) 型循環(huán)水式多用真空泵 ( 鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司) ; 精宏DHG-9146A 型電 熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱( 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司) ; XJA 100A 型高速粉碎機(jī)( 姜堰市銀河儀器廠) ; 京立LD25 － 2 離心機(jī)( 北京京立離心機(jī)有限公司) 。

1. 2 材料

澤蘭藥材購(gòu)自鄭州市東升大藥房，經(jīng)河南中醫(yī)藥 大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)科董成明教授鑒定為唇形科地筍屬 植物毛葉地瓜兒苗 Lycopus lucidus Turcz var. hirtus Ｒegel 的干燥地上部分。 無(wú)水乙醇( 天津市福晨化學(xué)試劑廠) 、苯酚( 天津 市恒星化學(xué)試劑有限公司) 、硫酸( 開(kāi)封市藥品化學(xué)試 劑廠) ，均為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2. 1 計(jì)算方法

藥材中以葡萄糖計(jì)多糖的提取率 W = m /M × 100% ( m 為以葡萄糖計(jì)藥材中多糖的質(zhì)量，M 為藥材 質(zhì)量) 。

2. 2 澤蘭多糖含量測(cè)定的方法

2. 2. 1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制

精密稱取 105 ℃ 干燥至恒重的無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 111. 16 mg，置 100 mL 容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度 為 1111. 6 μg /mL 的葡萄糖貯備液，備用。

2. 2. 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

精密吸取葡萄糖貯備液 0. 5，1. 0，2. 0，4. 0，6. 0，8. 0 mL 于 100mL 容量瓶中，蒸 餾水定容，搖勻，得葡萄糖濃度分別為 5. 558、11. 116、 22. 232、44. 464、66. 969、88. 928 μg /mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。 分別量取上述葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液與蒸餾水空白溶液 2. 0 mL 于 15 mL 試管中，分別加 1 mL 苯酚溶液、5 mL 濃 硫酸溶液振蕩搖勻，室溫反應(yīng) 30 min ，蒸餾水作為空 白，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線， 得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為: Y = 76. 591X － 0. 0846，r = 0. 9997， 結(jié)果表明，葡萄糖濃度在 5. 558 ～ 88. 928 μg /mL 范圍 內(nèi)，與吸光度線性關(guān)系良好。

2. 3 藥材粉碎的必要性考察

精密稱定未粉碎的藥材 5 份，每份 2 g。料液比 1: 30( g: mL) ，置具塞的 150 mL 的錐形瓶中，在超聲清 洗器中 25 ℃、700 W 超聲 15 min，2 次，提取液用 200 目濾網(wǎng)濾過(guò)合并兩次濾液。離心( 3000 r/min) 5 min， 棄去沉淀，上清液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至 20 mL。濃縮 液置燒杯中，把燒杯放在磁力攪拌器上，勻速快速攪 拌，緩慢加入 80 mL 無(wú)水乙醇，使溶液成 80% 的乙醇， 然后放在 4 ℃的冰箱里，靜置 1 h。離心( 3000 r/min) 5 min，用無(wú)水乙醇洗滌沉淀離心至上清液無(wú)色，沉淀 放在真空干燥箱 40 ℃，干燥至干，即得澤蘭粗多糖，稱 取澤蘭粗多糖 3 mg 左右，用蒸餾水定容在 25 mL 量瓶中，按“2. 2. 2”項(xiàng)下方法測(cè)其粗多糖中以葡萄糖計(jì)多 糖的含量，計(jì)算出藥材中以葡萄糖計(jì)多糖的質(zhì)量。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)在優(yōu)選超聲提取澤蘭多糖工藝參數(shù)時(shí)，首 先采用的響應(yīng)面的 Box － Behnken 法設(shè)計(jì)，用軟件 Design － Expert. 8. 05 進(jìn)行二次多項(xiàng)式擬合。結(jié)果顯示， 軟件自動(dòng)擬合的二次多項(xiàng)式方程，有多項(xiàng)因子對(duì)模型 的影響 P 值大于 0. 05，且失擬項(xiàng)的 P 值小于 0. 05，故 需要人工去因子重新擬合。可結(jié)果，進(jìn)行了多個(gè) 人工擬合方案都不能達(dá)到所有因子達(dá)到對(duì)模型顯著影 響，且失擬項(xiàng)的 P 值一直處在小于 0. 05 的水平上，這 說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)超聲提取澤蘭多糖的工藝選擇的參數(shù)值及 多糖提取率，不適合響應(yīng)面法分析，對(duì)二次多項(xiàng)式所建 立的模型的契合度不夠。因此，本實(shí)驗(yàn)采用了適應(yīng)性 較強(qiáng)的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)優(yōu)化超聲提取澤蘭多糖的工 藝。



 

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